Evaluation of Strongyloides stercoralis infection in patients with HTLV-1. / Evaluación de la infestación por Strongyloides stercoralis en pacientes con HTLV-1

INTRODUCTION: Individuals infected with the human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) may present severe and disseminated forms of Strongyloides stercoralis infection with low therapeutic response. OBJECTIVE: To investigate the S. stercoralis infection and the seroprevalence of IgG anti-S. stercoralis antibodies in individuals infected with HTLV-1 attending the Reference Center for HTLV-1 (CHTLV) in Salvador, Bahia, Brazil. MATERIALS AND METHODS: We conducted a cross-sectional study in 178 HTLV-1-infected individuals treated at the HTLV specialized center between January, 2014, and December, 2018. The parasitological diagnosis of S. stercoralis was performed using the Hoffman, Pons and Janer, agar plate culture, and Baermann-Morais methods. The IgG anti-S. stercoralis detection was performed using an in house enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The HTLV-1 infection was diagnosed using a commercial ELISA and confirmed by Western blot. RESULTS: The frequency of S. stercoralis infection was 3.4% (6/178). Individuals infected with S. stercoralis from rural areas (50.0%; 3/6) also showed S. stercoralis hyperinfection (>3,000 larvae/gram of feces). The frequency of circulating anti-S. stercoralis IgG antibodies was 20.8% (37/178). CONCLUSIONS: HTLV-1-infected people living in precarious sanitary conditions are more prone to develop severe forms of S. stercoralis infection. Considering the high susceptibility and unfavorable outcome of the infection in these individuals, the serological diagnosis for S. stercoralis should be considered when providing treatment.

Introducción. Los individuos infectados por el virus linfotrópico T humano tipo 1 (HTLV-1) pueden presentar formas graves y diseminadas de infestación por Strongyloides stercoralis con poca mejoría terapéutica. Objetivo. Investigar la infestación por S. stercoralis y la seroprevalencia de IgG anti-S. stercoralis en individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el Centro de Referencia para HTLV-1 (CHTLV), en Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Se hizo un estudio transversal con 178 individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el centro especializado de HTLV entre enero de 2014 y diciembre de 2018. El diagnóstico parasitológico de S. stercoralis se hizo mediante los métodos de Hoffman, Pons y Janer, cultivo en placa de agar y Baermann-Morais. Para la detección de IgG anti-S. stercoralis, se utilizó una prueba casera de inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA). La infección por HTLV-1 se diagnosticó usando un ELISA comercial y se confirmó mediante Western blot. Resultados. La frecuencia de infestación por S. stercoralis fue del 3,4 % (6/178). Además, los individuos infestados por S. stercoralis provenientes de la zona rural (50,0 %; 3/6) también mostraron hiperinfestación por S. stercoralis (>3.000 larvas/gramo de heces). La frecuencia de anticuerpos IgG anti-S. stercoralis fue del 20,8 % (37/178). Conclusiones. Las personas infectadas por HTLV-1 que viven en condiciones sanitarias precarias son más propensas a desarrollar formas graves de infestación por S. stercoralis. Teniendo en cuenta la gran vulnerabilidad y el resultado desfavorable de la infección en estos individuos, se debe considerar el diagnóstico serológico de S. stercoralis para administrar el tratamiento.

Evaluation of Strongyloides stercoralis infection in patients with HTLV-1 / Evaluación de la infestación por Strongyloides stercoralis en pacientes con HTLV-1

Introduction: Individuals infected with the human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) may present severe and disseminated forms of Strongyloides stercoralis infection with low therapeutic response. Objective: To investigate the S. stercoralis infection and the seroprevalence of IgG anti-S. stercoralis antibodies in individuals infected with HTLV-1 attending the Reference Center for HTLV-1 (CHTLV) in Salvador, Bahia, Brazil. Materials and methods: We conducted a cross-sectional study in 178 HTLV-1-infected individuals treated at the HTLV specialized center between January, 2014, and December, 2018. The parasitological diagnosis of S. stercoralis was performed using the Hoffman, Pons and Janer, agar plate culture, and Baermann-Morais methods. The IgG anti-S. stercoralis detection was performed using an in house enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The HTLV-1 infection was diagnosed using a commercial ELISA and confirmed by Western blot. Results: The frequency of S. stercoralis infection was 3.4% (6/178). Individuals infected with S . stercoralis from rural areas (50.0%; 3/6) also showed S. stercoralis hyperinfection (>3,000 larvae/gram of feces). The frequency of circulating anti-S. stercoralis IgG antibodies was 20.8% (37/178). Conclusions: HTLV-1-infected people living in precarious sanitary conditions are more prone to develop severe forms of S. stercoralis infection. Considering the high susceptibility and unfavorable outcome of the infection in these individuals, the serological diagnosis for S. stercoralis should be considered when providing treatment.

Introducción. Los individuos infectados por el virus linfotrópico T humano tipo 1 (HTLV-1) pueden presentar formas graves y diseminadas de infestación por Strongyloides stercoralis con poca mejoría terapéutica. Objetivo. Investigar la infestación por S. stercoralis y la seroprevalencia de IgG anti-S. stercoralis en individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el Centro de Referencia para HTLV-1 (CHTLV), en Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Se hizo un estudio transversal con 178 individuos infectados por HTLV-1 atendidos en el centro especializado de HTLV entre enero de 2014 y diciembre de 2018. El diagnóstico parasitológico de S. stercoralis se hizo mediante los métodos de Hoffman, Pons y Janer, cultivo en placa de agar y Baermann-Morais. Para la detección de IgG anti-S. stercoralis, se utilizó una prueba casera de inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA). La infección por HTLV-1 se diagnosticó usando un ELISA comercial y se confirmó mediante Western blot. Resultados. La frecuencia de infestación por S. stercoralis fue del 3,4 % (6/178). Además, los individuos infestados por S. stercoralis provenientes de la zona rural (50,0 %; 3/6) también mostraron hiperinfestación por S. stercoralis (>3.000 larvas/gramo de heces). La frecuencia de anticuerpos IgG anti-S. stercoralis fue del 20,8 % (37/178). Conclusiones. Las personas infectadas por HTLV-1 que viven en condiciones sanitarias precarias son más propensas a desarrollar formas graves de infestación por S. stercoralis. Teniendo en cuenta la gran vulnerabilidad y el resultado desfavorable de la infección en estos individuos, se debe considerar el diagnóstico serológico de S. stercoralis para administrar el tratamiento

The Predominance of Giardia duodenalis AII sub-assemblage in young children from Salvador, Bahia, Brazil. / Predominio del subconjunto AII de Giardia duodenalis en niños pequeños de Salvador, Bahía, Brasil

INTRODUCTION: Giardia duodenalis is an intestinal protozoan with a high prevalence in children of developing countries. Molecular studies revealed a great genetic diversity of G. duodenalis, with assemblages A and B found mainly in humans. Despite its importance, the information on the molecular epidemiology of human giardiasis is still limited in Brazil. OBJECTIVE: To characterize G. duodenalis molecular isolates in children from Salvador, Bahia, Brazil. MATERIALS AND METHODS: Giardia duodenalis positive fecal samples were obtained from 71 children from two day care centers and 39 users of a clinical analysis laboratory. Samples were analyzed by PCR-RFLP of the glutamate dehydrogenase (gdh) and beta-giardin genes and by the sequencing of beta-giardin. RESULTS: Of the 110 G. duodenalis samples, 80 (72.7%) amplified one or both target genes. Of these, 62 (77.5 %) were identified as assemblage A and 18 (22.5%) as assemblage B. The subassemblage AII was identified in 58.8% (n=47) of isolates followed by the sub-assemblage AI (18.8%, n=15), BIV (11.2%, n=9), and BIII (5.0%, n=4). The AII sub-assemblage was the most frequent in children of both day care centers whereas AI was found only in the group attended at the clinical laboratory. Sub-assemblage AII predominated in children under two years. CONCLUSIONS: The higher frequency of AII sub-assemblage suggests that anthroponotic transmission is more common in Salvador, but that zoonotic transmission pathways are also present and a change in susceptibility to different molecular patterns of Giardia may occur during child growth.

Introducción. Giardia duodenalis es un protozoo intestinal de gran prevalencia en los niños de los países en desarrollo. En estudios moleculares se ha evidenciado la gran diversidad genética de G. duodenalis y se han identificado los conjuntos A y B, principalmente en humanos. A pesar de su importancia, el conocimiento de la epidemiología molecular de la giardiasis humana aún es limitado en Brasil. Objetivo. Caracterizar los aislamientos moleculares de G. duodenalis de muestras tomadas a niños de Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Las muestras fecales positivas para G. duodenalis se obtuvieron de 71 niños de dos guarderías y de 39 usuarios de un laboratorio de análisis clínicos. Las muestras se analizaron mediante PCR-RFLP de los genes gdh y beta-giardin, y secuenciación de beta-giardin. Resultados. De las 110 muestras de G. duodenalis, en 80 (72,7 %) se amplificaron uno o ambos genes. De estos, 62 (77,5 %) se identificaron como pertenecientes al conjunto A y 18 (22,5 %) al B. El subconjunto AII se identificó en el 58,8 % (n=47) de los aislamientos, seguido del AI en el 18,8% (n=15), el BIV en el 11,2% (n=9) y el BIII en el 5,0% (n=4). El subconjunto AII fue el más frecuente en los niños de ambas guarderías, en tanto que el AI solo se encontró en el grupo atendido en el laboratorio clínico. El subconjunto AII predominó en los niños menores de dos años. Conclusiones. La mayor frecuencia del subconjunto AII sugiere que la transmisión antroponótica es más común en Salvador, pero también existen vías de transmisión zoonóticas, y que pueden ocurrir cambios en la sensibilidad frente a diferentes patrones moleculares de Giardia durante el crecimiento infantil.

Predominance of Giardia duodenalis AII sub-assemblage in young children from Salvador, Bahia, Brazil / Predominio del subconjunto AII de Giardia duodenalis en niños pequeños de Salvador, Bahía, Brasil

Introduction. Giardia duodenalis is an intestinal protozoan with a high prevalence in children of developing countries. Molecular studies revealed a great genetic diversity of G. duodenalis, with assemblages A and B found mainly in humans. Despite its importance, the information on the molecular epidemiology of human giardiasis is still limited in Brazil. Objective. To characterize G. duodenalis molecular isolates in children from Salvador, Bahia, Brazil. Materials and methods. Giardia duodenalis positive fecal samples were obtained from 71 children from two day care centers and 39 users of a clinical analysis laboratory. Samples were analyzed by PCR-RFLP of the glutamate dehydrogenase (gdh) and beta-giardin genes and by the sequencing of beta-giardin. Results. Of the 110 G. duodenalis samples, 80 (72.7%) amplified one or both target genes. Of these, 62 (77.5 %) were identified as assemblage A and 18 (22.5%) as assemblage B. The subassemblage AII was identified in 58.8% (n=47) of isolates followed by the sub-assemblage AI (18.8%, n=15), BIV (11.2%, n=9), and BIII (5.0%, n=4). The AII sub-assemblage was the most frequent in children of both day care centers whereas AI was found only in the group attended at the clinical laboratory. Sub-assemblage AII predominated in children under two years. Conclusions. The higher frequency of AII sub-assemblage suggests that anthroponotic transmission is more common in Salvador, but that zoonotic transmission pathways are also present and a change in susceptibility to different molecular patterns of Giardia may occur during child growth.

Introducción. Giardia duodenalis es un protozoo intestinal de gran prevalencia en los niños de los países en desarrollo. En estudios moleculares se ha evidenciado la gran diversidad genética de G. duodenalis y se han identificado los conjuntos A y B, principalmente en humanos. A pesar de su importancia, el conocimiento de la epidemiología molecular de la giardiasis humana aún es limitado en Brasil. Objetivo. Caracterizar los aislamientos moleculares de G. duodenalis de muestras tomadas a niños de Salvador, Bahía, Brasil. Materiales y métodos. Las muestras fecales positivas para G. duodenalis se obtuvieron de 71 niños de dos guarderías y de 39 usuarios de un laboratorio de análisis clínicos. Las muestras se analizaron mediante PCR-RFLP de los genes gdh y beta-giardin, y secuenciación de beta-giardin. Resultados. De las 110 muestras de G. duodenalis, en 80 (72,7 %) se amplificaron uno o ambos genes. De estos, 62 (77,5 %) se identificaron como pertenecientes al conjunto A y 18 (22,5 %) al B. El subconjunto AII se identificó en el 58,8 % (n=47) de los aislamientos, seguido del AI en el 18,8% (n=15), el BIV en el 11,2% (n=9) y el BIII en el 5,0% (n=4). El subconjunto AII fue el más frecuente en los niños de ambas guarderías, en tanto que el AI solo se encontró en el grupo atendido en el laboratorio clínico. El subconjunto AII predominó en los niños menores de dos años. Conclusiones. La mayor frecuencia del subconjunto AII sugiere que la transmisión antroponótica es más común en Salvador, pero también existen vías de transmisión zoonóticas, y que pueden ocurrir cambios en la sensibilidad frente a diferentes patrones moleculares de Giardia durante el crecimiento infantil.

Concordance between the zinc sulphate flotation and centrifugal sedimentation methods for the diagnosis of intestinal parasites / Concordancia entre los métodos de flotación con sulfato de zinc y sedimentación centrífuga para el diagnóstico de parásitos intestinales

Resumen Introduction: The diagnosis of intestinal parasitic infections depends on the parasite load, the specific gravity density of the parasite eggs, oocysts or cysts, and the density and viscosity of flotation or sedimentation medium where faeces are processed. Objective: To evaluate the concordance between zinc sulphate flotation and centrifugal sedimentation in the recovery of parasites in faecal samples of children. Materials and methods: Faecal samples of 330 children from day care centers were evaluated by zinc sulphate flotation and centrifugal sedimentation techniques. The frequencies of detection of parasites by each method were determined and the agreement between the diagnostic techniques was evaluated using the kappa index, with 95% confidence intervals. Results: The faecal flotation in zinc sulphate diagnosed significantly more cases of Trichuris trichiura infection when compared to centrifugal sedimentation (39/330; 11.8% vs. 13/330; 3.9%, p<0.001), with low diagnostic concordance between methods (kappa=0.264; 95% CI: 0.102-0.427). Moreover, all positive samples for Enterobius vermicularis eggs (n=5) and Strongyloides stercoralis larvae (n=3) were diagnosed only by zinc sulphate. No statistical differences were observed between methods for protozoa identification. Conclusions: The results showed that centrifugal flotation in zinc sulphate solution was significantly more likely to detect light helminths eggs such as those of T. trichiura and E. vermicularis in faeces than the centrifugal sedimentation process.

Abstract Introducción. El diagnóstico de infecciones parasitarias intestinales depende de la carga de parásitos, la densidad de la gravedad específica de los huevos, ooquistes o quistes de parásitos, y de la densidad y viscosidad de los reactivos de flotación o sedimentación usados para procesar las heces. Objetivo. Evaluar la concordancia entre el método de flotación de sulfato de zinc y la sedimentación por centrifugación en la recuperación de parásitos en muestras fecales de niños. Materiales y métodos. Se evaluaron las muestras fecales de 330 niños de guarderías mediante las técnicas de flotación con sulfato de zinc y de sedimentación por centrifugación. Se determinó la frecuencia de detección de parásitos con cada método y se evaluó la concordancia entre las técnicas de diagnóstico mediante el índice kappa, con intervalos de confianza del 95 %. Resultados. Mediante la flotación fecal con sulfato de zinc, se diagnosticó un número significativamente mayor de casos de infección por Trichuris trichiura que con la sedimentación por centrifugación (39/330; 11,8 % Vs. 13/330; 3,9 %) (p<0,001), con poco acuerdo entre los métodos (kappa=0,264; IC95% 0,102-0,427). Además, todas las muestras positivas para huevos de Enterobius vermicularis (n=5) y larvas de Strongyloides stercoralis (n=3) se diagnosticaron solamente por sulfato de zinc. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los métodos para la identificación de protozoos. Conclusiones. La flotación centrífuga en una solución de sulfato de zinc presentó una probabilidad significativamente mayor de detectar los huevos livianos de helmintos como T. trichiura y E. vermicularis en heces, que el proceso de sedimentación por centrifugación.